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“液相色譜儀”的分類

2022-11-24 14:36:30 

液相色譜根據(jù)分離機(jī)理的不同可分為:液-固吸附色譜、液-液分配色譜、離子交換色譜、離子對(duì)色譜法、分子排阻色譜(或凝膠滲透色譜)等。

液相色譜儀器

1、液-固吸附色譜

流動(dòng)相為液體,固定相為固體吸附劑,是通過組分在兩相間的多次吸附與解吸平衡實(shí)現(xiàn)分離的。適合分離的物質(zhì)為中等相對(duì)分子質(zhì)量的油溶性試樣,凡是能夠用薄層色譜分離的物質(zhì)均可用此法分離。

2、液相色譜儀液-液分配色譜

流動(dòng)相和固定相都是液體的色譜法即為液液分配色譜。該方法是利用樣品組分在兩種不相溶的液相間的分配來進(jìn)行分離。一種液相為流動(dòng)相,另一種是涂于載體上的固定相??梢苑蛛x各種無機(jī)、有機(jī)化合物

流動(dòng)相極性小于固定相極性的液-液色譜法稱為正相分配色譜法。

流動(dòng)相極性大于固定相極性的液-液色譜法稱為反相分配色譜法。

3、離子交換色譜

以離子交換樹脂或化學(xué)鍵合離子交換劑為固定相,利用被分離組分離子交換能力的差別或選擇性系數(shù)的差別而實(shí)現(xiàn)分離。

按照可交換離子所帶電荷符號(hào)的不同又可分為陽離子交換色譜法和陰離子交換色譜法。

離子交換色譜主要是用來分離離子或可離解的化合物。它不僅廣泛地應(yīng)用于無機(jī)離子的分離,而且廣泛地應(yīng)用于有機(jī)和生物物質(zhì),如氨基酸、核酸、蛋白質(zhì)等的分離,在生物化學(xué)領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。

4、液相色譜儀離子對(duì)色譜法

將一種或多種與目標(biāo)化合物離子電荷相反的離子(稱為離子對(duì))加入到流動(dòng)相或者固定相中,使其與目標(biāo)化合物離子結(jié)合形成離子對(duì)化合物,從而影響目標(biāo)化合物的保留行為。離子對(duì)色譜和反相色譜有很多共同的地方。使用的固定相和流動(dòng)相大致相似,不同的是,在離子對(duì)色譜的流動(dòng)相中加入了離子對(duì)試劑。

離子對(duì)試劑通常分為以下兩類:

用于酸性化合物:三乙胺,四丁基氫氧化銨,四丁基溴化銨,十二烷基三甲基氯化銨等。

用于堿性物質(zhì):三氟乙酸,戊烷磺酸鈉,己烷磺酸鈉,庚烷磺酸鈉,辛烷磺酸鈉,十二烷基磺酸鈉,十二烷基硫酸鈉等。

具體離子對(duì)試劑的選擇沒有什么特殊的要求,根據(jù)目標(biāo)化合物的酸堿性進(jìn)行選擇就好。如果目標(biāo)化合物是弱酸性或弱堿性的,離子對(duì)試劑對(duì)應(yīng)選擇強(qiáng)堿性或強(qiáng)酸性為最佳。

離子對(duì)色譜法特別適合一些生化試樣如核酸、核苷、生物堿以及藥物等分離。

5、液相色譜儀分子排阻色譜法

分子排阻色譜法又稱空間排阻色譜法(SEC)、凝膠色譜法,是利用多孔凝膠固定相的獨(dú)特性產(chǎn)生的一種,主要根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與高分子樣品分子的線團(tuán)尺寸間的相對(duì)關(guān)系而對(duì)溶質(zhì)進(jìn)行分離分析的方法。

適用于對(duì)未知樣品的探索分離,它能很快提供樣品按分子大小組成的全面情況,并迅速判斷樣品是簡單的還是復(fù)雜的混合合物,并提供樣品中各組分的近似分子量。這種分離方法不宜用于分子大小組成相似或分子大小僅差10%的組分分析,如同分異構(gòu)體的分離不宜用分子排阻色譜法。

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